GenScript预制胶选择指南

BET9登录网址卵白预制胶推荐使用GenBox电泳槽，奇异挡板使PAGE胶受力匀称，电泳条带越发平直
。

BET9登录网址卵白预制胶可兼容海内外常见mini凝胶电泳槽，部分电泳槽名称如下：

Bio-Rad Mini-PROTEAN^? II&3电泳槽*

六一、天能

GradiGel Mini 4-Cell

IBI Universal Protein System

EC 4-Cell

Hoefer Mighty Small?（SE250/SE260）

Daiichi Mini 2-Gel&6-Gel

Invitrogen Novex XCell & Surelock^?（搭配BET9登录网址特供挡板一起使用）

*使用前请将电泳槽内芯绿色胶条反转，详情见说明书

BET9登录网址卵白预制胶可兼容MOPS或MES电泳缓冲液，能实现更宽规模分子量卵白的疏散，搭配MOPS使用更好的疏散大分子卵白（>30kDa)，搭配MES使用能更好的疏散小分子卵白（<30kDa) 
。

预制胶类型	孔数	最大上样量/well	推荐卵白量/well
SurePAGE™卵白预制胶	10	80 ?l	60 ?g
	12	60 ?l	60 ?g
	15	40 ?l	60 ?g

BET9登录网址提供两种上样缓冲液：5X Sample Buffer（Cat. No. MB01015）含变性剂SDS和10%还原剂β-巯基乙醇；4X LDS Sample Buffer（Cat. No. M00676）含变性剂LDS，不含还原剂
。

下图显示，与SDS样品缓冲液相比，LDS样品缓冲液可以更好地疏散卵白质样品
。

产品详情

• 应用数据

  超强均一性

  

  凝胶：SurePAGE，4-12%，12 wells（Genscript，M00653）
  染色：eStain卵白染色仪（Genscript，L00657C），9min 30s
  Lane1，3，5，7，9，11：4μl Color Prestained Protein Standard，Broad Range (11-245kDa) (P7712S)；
  Lane2，4，6，8，10，12：6μl E.coli cell lysate
  。

  BET9登录网址奇异的凝胶制造工艺包管批次间优异的稳固性和可靠的条带漫衍一致性
  。

  优越的区分率

  

  从图中可以看出，SurePAGE卵白预制胶的区分率优于Express Plus和Competitor A和B，尤其在30KDa以下的小片断的区分率上更高，条带越发锐利和清晰
  。

  凝胶：SurePAGE，4-12%，12 wells（Genscript，M00653）
  样品：Top 10 cell
  染色：eStain卵白染色仪（Genscript，L00657C），9min 30s

  超高的迅速度

  

  从下图中可以看出从下图中可以看出SurePAGE?预制胶能够检测含量低至12.5ng的卵白样品，比其他产品具有更高的检测迅速度
  。

  凝胶：SurePAGE?，4-12%，12 wells（Genscript，M00653）
  样品：
  Lane 1：Protein Standard（MM1397-500），5μl；
  Lane 2-8：溶菌酶含量划分为800ng，400ng，200ng，100ng，50ng，25ng，12.5ng；
  Lane 9-10：Protein Standard（MM1397-500），5 ul
  染色：eStain卵白染色仪（Genscript，L00657C），9min 30s
  

  Western blot转印剖析

  

  SurePAGE卵白预制胶的迅速度和区分率很优越，能够确保低含量的卵白条带也能够清晰锐利，在Western blot转印之后含量低的小条带能够顺遂地被检测到，有了SurePAGE?预制胶这个助手，您的Western blot实验会越发轻松！

  凝胶：SurePAGE? Gel，4-20%，10 wells（GenScript，M00655）
  转膜：eBlot? L1快速湿转仪（L00686），10min，NC膜
  上样：WB-MASTER Protein Standard（GenScript，M00521），其中80KDa条带的卵白含量
  从左到右依次为：10ng，5ng，2.5ng，1.25ng，0.625ng，0.3125ng
  。

• 产品参数

  凝胶厚度	1.0 mm
  凝胶系统	Bis-Tris
  凝胶巨细	Mini Gels (10 x 8 cm)
  保质期	2-8℃贮存18个月，常温25℃左右可生涯6个月
  电泳缓冲液	Tris-MOPS-SDS Running Buffer Powder (Cat. No. M00138) 或MES SDS Running Buffer Powder (Cat. No. M00677)

产品列表

• SurePAGE?卵白预制胶

  产品编号	名称	数目	价钱	操作
  M00652	SurePAGE?, Bis-Tris, 10x8, 4-12%, 10 wells		￥350.00 10 PK/BOX
  M00653	SurePAGE?, Bis-Tris, 10x8, 4-12%, 12 wells		￥350.00 10 PK/BOX
  M00654	SurePAGE?, Bis-Tris, 10x8, 4-12%, 15 wells		￥350.00 10 PK/BOX
  M00655	SurePAGE?, Bis-Tris, 10x8, 4-20%, 10 wells		￥350.00 10 PK/BOX
  M00656	SurePAGE?, Bis-Tris, 10x8, 4-20%, 12 wells		￥350.00 10 PK/BOX
  M00657	SurePAGE?, Bis-Tris, 10x8, 4-20%, 15 wells		￥350.00 10 PK/BOX
  M00658	SurePAGE?, Bis-Tris, 10x8, 8-16%, 10 wells		￥350.00 10 PK/BOX
  M00659	SurePAGE?, Bis-Tris, 10x8, 8-16%, 12 wells		￥350.00 10 PK/BOX
  M00660	SurePAGE?, Bis-Tris, 10x8, 8-16%, 15 wells		￥350.00 10 PK/BOX
  M00661	SurePAGE?, Bis-Tris, 10x8, 8%, 10 wells		￥350.00 10 PK/BOX
  M00662	SurePAGE?, Bis-Tris, 10x8, 8%, 12 wells		￥350.00 10 PK/BOX
  M00663	SurePAGE?, Bis-Tris, 10x8, 8%, 15 wells		￥350.00 10 PK/BOX
  M00664	SurePAGE?, Bis-Tris, 10x8, 10%, 10 wells		￥350.00 10 PK/BOX
  M00665	SurePAGE?, Bis-Tris, 10x8, 10%, 12 wells		￥350.00 10 PK/BOX
  M00666	SurePAGE?, Bis-Tris, 10x8, 10%, 15 wells		￥350.00 10 PK/BOX
  M00667	SurePAGE?, Bis-Tris, 10x8, 12%, 10 wells		￥350.00 10 PK/BOX
  M00668	SurePAGE?, Bis-Tris, 10x8, 12%, 12 wells		￥350.00 10 PK/BOX
  M00669	SurePAGE?, Bis-Tris, 10x8, 12%, 15 wells		￥350.00 10 PK/BOX
  M00719	SurePAGE?, Bis-Tris, 10x8, 15%, 12 wells		￥350.00 10 PK/BOX

• 卵白预制胶电泳相关试剂列表

  产品编号	名称	数目	价钱	操作
  M00138	Tris-MOPS-SDS Running Buffer Powder		￥150.00 1 Box (5/PK)
  M00139	Transfer Buffer Powder		￥248.00 1 Box (10/PK)
  M00676	4X LDS Sample Buffer		￥100.00 10 ml 250 ml
  M00677	MES SDS Running Buffer Powder		￥150.00 1 box(5pcs)
  MB01015	5X Sample Buffer		￥150.00 5 ml

卵白纯化、剖析相关产品

资源

常见问题解答

• 1. BET9登录网址卵白预制胶在使用前，有哪些注重事项？

  BET9登录网址卵白预制胶翻开包装即可用于卵白电泳实验，但请一定撕掉胶板底部蓝色封口胶带、不可使用Tri-Gly电泳缓冲液、并请检查电泳槽密封条是否需要翻转，以包管内槽密封
  。

• 2. 使用BET9登录网址卵白预制胶，应该使用什么电泳缓冲液？

  GenScript卵白预制胶可兼容MOPS或MES电泳缓冲液，能实现更宽规模分子量卵白的疏散，搭配MOPS使用更好的疏散大分子卵白（>30kD)，搭配MES使用能更好的疏散小分子卵白（<30kD) 
  。不适配Tris-Gly电泳缓冲液，体现为电泳到凝胶一半位置无法继续迁徙，且marker分不开
  。

• 3. 1 Х MOPS电泳缓冲液配制后是否需要调理pH值？

  BET9登录网址Tris-MOPS-SDS Running Buffer Powder（Cat.No：M00138）在产品设计时已经思量了制品缓冲液pH值
  。配制成溶液后即可用于卵白电泳实验，pH≈7.6
  。

• 4. 5X Sample Buffer（Cat. No. MB01015）和4X LDS Sample Buffer（Cat. No. M00676）的区别是什么，是否含还原剂？

  BET9登录网址提供5X Sample Buffer含变性剂SDS和10%还原剂β-巯基乙醇；4X LDS Sample Buffer含变性剂LDS，不含还原剂，如需要可以凭听说明书中比例特殊添加
  。

• 5. 一块胶完成电泳需要多长时间？

  电泳时间取决于选取的电泳缓冲液、凝胶浓度以及兴趣卵白的分子量巨细
  。在MOPS电泳缓冲液，200V恒压条件下，电泳时间通常是30+分钟，一片凝胶电泳时，初始电流约莫在95-120mA
  。高电压会引起电泳实验系统温度上升，导致电泳历程泛起不可预料的情形，适当降低电泳仪输出电压设定，可以资助改善电泳情形
  。

• 6. ExpressPlus?预制胶和SurePAGE?预制胶可以用于哪些电泳槽？

  兼容以下电泳槽：

  • 六一、天能
  • GradiGel Mini 4-Cell
  • IBI Universal Protein System
  • EC 4-Cell
  • Hoefer Mighty Small（SE 260/SE 250）
  • Daiichi Mini 2-Gel&6-Gel
  • Bio-Rad Mini-PROTEANII&3
  • Invitrogen Novex XCell I，II，&Surelock（须与BET9登录网址提供的挡板一起使用）
• 7. GenScript卵白预制胶后续做WB实验推荐卵白上样量是几多？

  由于每个样品稚窨的卵白含量以及抗体和卵白团结的效果都纷歧样，建议通过预实验探索最佳上样量或参考文献；第一次做可以从10ug最先梯度上样，再通过实验效果调解
  。

• 8. 卵白预制胶的pH值为几多？

  BET9登录网址Bis-Tris卵白预制胶pH6.4
  。

• 9. BET9登录网址卵白预制胶能否用于非变性电泳？

  预制胶不含SDS，可以用于酸性卵白（PI<6.4）非变性电泳
  。整套电泳系统中不可含有SDS，搭配非变性电泳缓冲液（Cat. No. M00727C/M00729C）和上样缓冲液（Cat. No. M00726C）使用
  。

• 10. 使用BET9登录网址卵白预制胶举行非变性电泳 ，是否有推荐的实验条件？

  非变性电泳由于受卵白质的亚基及电荷量少的影响，保存条带偏移率低（泳动速率慢）、条带不敷尖锐等征象
  。由于非变性电泳时间较长，请凭证实验设计先举行电泳条件优化
  。电泳缓冲液应调至碱性使酸性卵白尽可能多的带上电荷，每个卵白的性子和带电量都纷歧样，详细需要通过实验探索最适电泳条件和PH值
  。

• 11. GenScript预制胶是否可以跑还原/非还原电泳吗？

  可以，预制胶中不含还原剂，可凭证实验需要，在上样缓冲液中添加还原剂
  。

• 12. 电泳历程中，溴酚蓝前沿上方为什么会有一条黄色的线？

  Loading buffer中有酚红，酚红在PH值6.8以内为黄色，在pH值8.4以上时为红色，不影响实验效果
  。

• 13. 可以后续切胶做质谱吗？

  可以
  。

• 14. MOPS浓缩液变黄可以使用吗？

  MOPS和Tris会爆发氧化，保质期内变黄不影响使用
  。

• 15. 为什么在卵白转印时凝胶变的很粘？

  低浓度凝胶质地较软，转膜时易受热，与转印膜粘连
  。

• 16. 其他公司的出品的染料是否可以用于BET9登录网址预制胶染色？

  每家公司的卵白染料产品配方差别
  。以考马斯亮蓝G250或R250为主要因素的染色液与ExpressPlus预制胶产品兼容性较好
  。推荐使用BET9登录网址出品的eStain L1卵白染色仪（Cat.No：L00657）对电泳后凝胶举行处置惩罚
  。现在确认BET9登录网址卵白预制胶与Thermo Fisher Scientific Inc.的染料不兼容
  。天根生化科技（北京）有限公司的考马斯亮蓝快速染色液可用于ExpressPlus预制胶产品的染色
  。

• 17. 住宿脱色会影响条带的锐度吗？

  差别的脱色液配方会影响脱色效果
  。推荐用于住宿脱色的脱色液配方是：15%乙醇，10%乙酸的水溶液
  。

• 18. ExpressPlus?预制胶和SurePAGE?预制胶在室温下稳固吗？

  SurePAGE™在25℃左右可生涯6个月
  。为获得更佳的实验效果，请2-8℃生涯
  。

• 19. 怎样使用古板染色脱色要领处置惩罚卵白预制胶？
  • A. 考马斯亮蓝R-250使用微波炉染色：
  1. 配制染色液：在40%乙醇和10%醋酸溶液中消融终浓度为0.1%（W/V）的考马斯亮蓝R-250
     。
  2. 配制脱色液：将终浓度为10%（V/V）乙醇、7.5%（V/V）醋酸消融在一起
     。
  3. 电泳完成后，撬开胶板取出凝胶，然后放入装有100ml染色液的染色容器中
     。
  4. 盖上容器盖子并放入微波炉中用高热档位加热8分钟
     。为了阻止危险，请注重不要让溶液欢喜
     。
  5. 从微波炉中取出染色容器，放在脱色摇床上常温轻摇5分钟
     。
  6. 倒掉染色液并用去离子水小心洗濯凝胶
     。
  7. 倒掉去离子水，并加入100ml脱色液
     。
  8. 盖上盖子，放入微波炉中用高热档位加热8分钟
     。
  9. 倒掉脱色液，加入新的脱色液，重复办法8
     。
  10. 从微波炉中取出，放在脱色摇床上常温轻轻震荡至配景清晰
      。
  • B. 考马斯亮蓝R-250通例染色：
  1. 配制染色液：在40%乙醇和10%醋酸溶液中消融终浓度为0.1%（W/V）的考马斯亮蓝R-250
     。
  2. 配制脱色液：将终浓度为10%（V/V）乙醇、7.5%（V/V）醋酸消融在一起
     。
  3. 电泳完成后，撬开胶板取出凝胶，然后放入装有100ml染色液的染色容器中
     。
  4. 放于摇床上轻摇1小时
     。
  5. 倒掉染色液并用去离子水小心洗濯凝胶
     。
  6. 倒掉去离子水，并加入100ml脱色液
     。
  7. 放于摇床上轻摇1小时
     。
  8. 替换新鲜脱色液，继续放于摇床上脱色1小时
     。
  9. 重复办法7、8一次
     。
  10. 替换新鲜脱色液，放于摇床上住宿脱色至越日配景清晰
      。
• 20. 预制胶疑难明答

  问题	可能缘故原由	解决要领
  条带变形	上样孔中有气泡或者有凝胶生涯缓冲液 。	加注电泳缓冲液前后，使用注射器吸收缓冲液轻轻冲洗上样孔，将气泡吹出 。
  	样品卵白浓度过高 。	使用上样缓冲液稀释卵白样品 。
  条带拖曳、滞孔	样品中含有较大颗粒杂质如细胞碎片、菌体碎片 。	高速离心后，取上清液电泳 。
  	卵白样品（如容纳体卵白）	在样品中添加特另外十二烷基硫酸钠硫酸钠（SDS）或者使用上样缓冲液稀释样品 。
  	未充分消融 。
  高浓度条带泛起在相邻泳道	上样时，样品溢出到相邻条带 。	降低上样量 。发明溢出时使用缓冲液冲洗上样孔 。
  	上样孔破损	移除制孔梳时加倍小心 。发明上样孔破损后换用新的凝胶 。
  	胶板变形 。	在装置预制胶时先移除制孔梳，再牢靠在电泳槽内 。
  		使用垫片、翻转密封条时注重是否会对凝胶爆发过大的压力，导致凝胶变形 。
  	凝胶变干，上样孔萎缩 。	翻开包装后，避免凝胶干燥 。
  		为避免凝胶变干，可以尽快装置到电泳槽内，并加注电泳缓冲液 。
  		嫌疑凝胶变干时，可将凝胶在电泳缓冲液中浸泡一段时间，待凝胶恢复形状后上样 。
  泳道整体成外“八”字形	电泳槽内槽漏液	确认电泳槽与BET9登录网址预制胶是否匹配，若有蹊径状硅胶条应翻转到平展的一面 ；
  		电泳槽两头只管水平，将内槽液加满，并视察5min内槽液是否有液面降低情形，若有请重新检查装置；
  		避免电泳液泛起大宗气泡；
  		如仍然漏液，建议替换电泳槽，或在电泳历程中补加内槽液，确保内槽液加满状态 。
  	胶板变形 。	装置预制胶时先移除制孔梳，再牢靠在电泳槽内 。
  		使用垫片、翻转密封条时注重是否会对凝胶爆发过大的压力，导致凝胶变形 。
  条带迁徙速度过慢	凝胶底部绿色胶带未移除 。	移除绿色密封胶带 。
  	凝胶装置不当，电泳槽内槽漏液（与外槽有溶液联通征象） 。	检查内槽密封条、垫片等附件是否装置适当 。
  		确认凝胶装置位置，重新装置凝胶 。
  	电压设置有误，或者使用了不当的电泳缓冲液 。	推荐使用140V恒压条件电泳 。
  		推荐使用准确浓度的MOPS电泳缓冲液
  卵白条带前沿模糊	离子滋扰（小分子卵白电泳容易泛起此征象） 。	换用MES电泳缓冲液 。
  卵白条带前沿变黄	电泳缓冲液性能下降，pH降低	换用新鲜配制的电泳缓冲液 。
  	外槽液太少	外槽电泳液加到2/3处，避免电泳历程中温度过高
  	使用双方夹紧架胶类型的电泳槽如伯乐、天能（会概率性的使板变形从而跑黄）	推荐使用GenScript配套电泳槽（Cat.No. L00780），受力更匀称，
  卵白疏散效果不佳	凝胶浓度选择不当 。	凭证凝胶最佳疏散规模选用差别浓度凝胶 。
  		关于小分子卵白的疏散，请选用较高疏散胶浓度的预制胶产品或者换用专门为小卵白开发的预制胶产品 。
  	样品卵白量凌驾凝胶疏散能力 。	降低上样量，将总卵白量控制在60μg以内
  	样品含盐量过高 。	使用透析、超滤，或者稀释的要领降低盐浓度后电泳 。
  	电泳系统温度过高 。	提高电泳缓冲液用量 。
  		或者使用冰袋对缓冲液降温降温、在低温情形中举行电泳实验等要领改善效果 。
  	MOPS电泳缓冲液性能无法抵达实验设计要求 。	换用MES电泳缓冲液举行实验 。
  8%的胶在转膜时粘在膜上	凝胶浓度低、质地较软，转膜时易受热，与转印膜粘连 。	添加冰袋、或在低温情形中举行实验，控制转膜温度 。
  酸性卵白的非变性电泳条带模糊，点样空周围跑不下来	非变性电泳由于受卵白质的亚基及电荷量少的影响，保存涌动速率慢、条带不敷尖锐等征象 。	优化电泳缓冲液的pH，包管卵白条带带有足够的电量 。
  碱性卵白的非变性电泳效果不睬想	BET9登录网址卵白预制胶不适合跑碱性卵白的非变性电泳 。	建议客户使用手工玻璃胶，探索电泳缓冲液的pH举行电泳 。