镍填料

Ni-NTA填料

High Affinity Ni-Charged Resin FF（L00666）是一种6%高交联琼脂糖基质，共价偶联螯合剂NTA，通过四个配位键团结Ni²⁺，高亲和性纯化多组氨酸标记的重组卵白。High Affinity Ni-Charged Resin FF具有低的Ni²⁺走漏，高的卵白质团结能力和稳固性，并可耐受卵白质纯化中多种化学试剂。这使得Ni-NTA填料成为了纯化6x His标签融合卵白的最佳选择。

• 表1. Ni-NTA亲和层析介质的特征

  骨架基质	6%交联的琼脂糖凝胶
  平均粒径	90?m（45-165 ?m）
  配体	NTA
  载量	≥50mg/ml，即50mg含His标签的目的卵白（34KD）/ml填料
  存储溶液	20%乙醇（纯填料体积占比50%）
  存储温度	2-8°C，阻止冻存
  重复使用次数	可重复多次使用

• 应用案例

  1、实验条件

  • 仪器：蠕动泵，玻璃层析柱
  • 样品：Recombinant Protein A in E.coli extract（目的卵白分子量：34KD）
  • 样品体积：21L大肠杆菌裂解液（菌泥来自70L*2发酵罐）
  • 柱体积：约4.1L（D：200mm
    
    ；H：13.1cm）
  • 平衡：60 mM NaH₂PO₄, 300 mM NaCl, 10 mM imidazole, pH 8.0
    
    ；流速500ml/min，5倍柱体积
  • 上样：60 mM NaH₂PO₄, 300 mM NaCl, 10 mM imidazole, pH 8.0
    
    ；流速500ml/min
  • 洗杂：60 mM NaH₂PO₄, 300 mM NaCl, 10-20 mM imidazole, pH 8.0
    
    ；流速700ml/min，10倍柱体积
  • 洗脱：60 mM NaH₂PO₄, 300 mM NaCl, 250 mM imidazole, pH 8.0
    
    ；流速500ml/min
  • 溶液置换：透析或超滤至1*PBS溶液中

  2、实验效果

  

  图1. L00666纯化测试SDS-PAGE剖析图

  实验效果说明：Ni-NTA纯化载量高，结协力强，纯度高

• 订购信息

  产品编号	名称	数目	价钱	操作
  L00666	High Affinity Ni-Charged Resin FF		￥403.00 5 ml Resin (Total 10 ml) 25 ml Resin (Total 50 ml) 100 ml Resin (Total 200 ml)

Ni-TED填料

High Affinity Ni-TED Resin FF（L00885）是一款新型的牢靠化金属螯合层析（IMAC）填料，是将TED偶联至6%琼脂糖凝胶介质上，通过五个配位键螯合Ni²⁺离子。该填料主要用于捕获和纯化渗透到真核表达作育基上清中的组氨酸标签（His-tag）卵白。与其它螯合剂填料相比，High Affinity Ni-TED resin具有更强的组分兼容性，可以在含有一定浓度的EDTA及DTT的情形下举行目的卵白的高效纯化。

• 表2. Ni-TED亲和层析介质的特征

  骨架基质	高交联的6%琼脂糖凝胶
  平均粒径	90μm（45～165μm）
  配体	TED
  动态载量	10mg/ml，即10mg含His标签的目的卵白（34KD）/ml填料
  耐受压力	0.3MPa，3bar
  推荐流速	150-600cm/h
  贮存溶液	20%乙醇（纯填料体积占比50%）
  贮存温度	2～8℃，阻止冻存
  重复使用次数	可重复多次使用

• 应用案例
  

  图2. Ni-NTA和Ni-TED耐受化学试剂的比照实验

  实验效果说明：Ni-TED对化学试剂的耐受性略高于Ni-NTA

• 订购信息

  产品编号	名称	数目	价钱	操作
  L00885	High Affinity Ni-TED Resin FF		￥1253.00 10 ml Resin (Total 20 ml) 50 ml Resin (Total 100 ml) 100 ml Resin (Total 200 ml)