图1: 差别级别Cas9卵白在原代T细胞的TRAC基因敲除实验的基因敲除效率剖析。划分使用RUO级别和GMP级别的野生型和突变型Cas9卵白,搭配BET9登录网址合成的sgRNA ,通过电转方法对人原代T细胞举行TRAC基因敲除实验。该效果批注GMP级别的Cas9卵白在T细胞的TRAC位点敲除实验中,与RUO级别Cas0卵白产品拥有高度一致的基因敲除效率,敲除效率均为95%以上。随着开发项目逐渐向临床阶段推进,可以较快的从RUO级别Cas9卵白产品转换到GMP级别Cas9卵白产品。
本次实验系统:
参数 | 数值 |
Cas9卵白用量 | ~4 μg |
Cas9: sgRNA (摩尔比) | 1:2 |
RNP投入量 | ~25 pmol |
细胞数 | 1.0 × 106 |
反应体积 | 20 μl |